Československý transplantační kongres

Organizace kongresu

4. československý transplantační kongres
13.-15.9.2012

Organizace kongresu

1. československý transplantační kongres
16.-18.11.2006, Brno

  • Konferenční abstrakta

    2. československý transplantační kongres
    10.-12.9.2008, Starý Smokovec

  • Konferenční abstrakta

    3. československý transplantační kongres
    16.-18.9.2010




  • Konferenční abstrakta 2006

    Abstrakta přednášek – sekce lékařů

    SKÚSENOSTI S MERANÍM HLADINY MRNA CYTOTOXICKÝCH PROTEÍNOV GRANZÝMU B A PERFORÍNU V BUNKÁCH MOČA U PACIENTOV PO TRANSPLANTÁCII OBLIČKY

    Žilinská Z., Bandžuchová E.1, Kuba D.1
    FN Bratislava, 1SCOT SZU, Bratislava

    Úvod:
    Akútna rejekcia po transplantácii obličky má negatívny vplyv na dlhodobé prežívanie štepu. Štandardná technika používaná na diagnózu a vyhodnotenie akútnej dysfunkcie štepu je biopsia. Markermi aktivácie buniek pri akútnej rejekcii sú cytotoxické proteíny granzým B a perforín, produkované pri apoptóze mediovanej cytotoxickými T-lymfocytmi. Rozvoj citlivých molekulových metód na detekciu mRNA umožnil monitorovanie expresie mRNA v malom počte buniek uvoľnených do moča.

    Ciele:
    Cieľom práce je porovnanie metód RT-PCR s vizuálnym vyhodnotením a real-time RT-PCR na stanovenie expresie granzýmu B a perforínu v moči pacientov s akútnou rejekciou, chronickou rejekciou, stabilnou funkciou štepu a u zdravých kontrol.

    Metódy:
    Izolácia celkovej RNA z močového sedimentu pomocou Trizolu a príprava cDNA použitím MultiScribe reverznej transkriptázy a oligo d(T)16 primeru. 1. PCR amplifikácia, detekcia po elektroforéze v 2% agarózovom géli s etídium bromidom, vizuálne hodnotenie pozitivity. 2. Real-time PCR s použitím značených špecifických oligonukleotidových prób. Normalizovanie výsledkov vzhľadom na endogénnu kontrolu GAPDH a stanovenie relatívnej expresie v porovnaní s kontrolnou skupinou. Skupiny pacientov: Akútna rejekcia, chronická rejekcia, stabilná funkcia, zdravá kontrola.

    Záver:
    Pri porovnaní metód je metóda real-time PCR rýchlejšia, technicky menej náročná, presnejšia a vyhodnotenie nie je zaťažené individuálnou chybou. Stanovenie hladiny mRNA granzýmu B je špecifickejšie pre predikciu akútnej rejekcie.

    Zpět