Československý transplantační kongres
 |
|
1. československý transplantační kongres 2. československý transplantační kongres |
Konferenční abstrakta 2008
Abstrakta přednášek – sekce sester
TRANSPLANTACE LANGERHANSOVÝCH OSTRŮVKŮ V IKEM - TECHNIKA IZOLACE
E. Dovolilová, P. Girman, Z. Berková, K. Zacharovová, T. Koblas, L. Pektorová, M. Mindlová, E. Vávrová, V. Bobek, F. Saudek
Laboratoř Langerhansových ostrůvků, IKEM, Praha
• IKEM -Laboratoř Langerhansových ostrůvků Vídeňská 1958 140 21 Praha 4
Klinický program transplantace Langerhansových ostrůvků (TX LO) byl zahájen v roce 2005 po několikaleté experimentální přípravě. K izolaci Langerhansových ostrůvků (LO) se používají pankreaty od zemřelých dárců, které splňují daná kriteria a nejsou vhodné k orgánové transplantaci.
Ostrůvky izolujeme podle edmontonského protokolu, na jehož vypracování se podílelo 10 světových pracovišť. Postup jsme upravili podle našich pracovních podmínek a laboratoř vybavili vlastními prototypy izolačního zařízení. Pankreas se nejprve injekcí do vývodu naplní roztokem kolagenázy. Tento proteolytický enzym po zahřátí na 37 °C rozvolní exokrinní tkáň pankreatu a uvolní tak jednotlivé ostrůvky, jež jsou uloženy disperzně v celém pankreatu. Uvolněné ostrůvky oddělujeme od exokrinní tkáně v buněčném separátoru Cobe 2991 na principu centrifugace v tzv. hmotnostním gradientu. Zde se jednotlivé komponenty tkáně pankreatu usazují v rozdílných vrstvách, odpovídajících jejich specifické hmotnosti. Z původního objemu dezintegrované tkáně 20-50 ml získáme 1- 2 ml čisté tkáně ostrůvků. Ostrůvky počítáme metodou digitální obrazové analýzy. Pro transplantaci je potřebné min. množství 300 000 vitálních ostrůvkových ekvivalentů (IEQ). Vitalitu zjišťujeme testováním sekrece inzulinu a fluorescenčním barvením živých a mrtvých buněk. Ostrůvky uchováváme v tkáňové kultuře a transplantujeme do 24 hodin po izolaci. Izolace ostrůvků je technicky i časově velmi náročná. Vyžaduje spolupráci 4 zaškolených osob a trvá 8-10 hodin.
Od roku 2005 do května 2008 bylo provedeno celkem 20 transplantací ostrůvků, z toho 3 autotransplantace. Rok 2005 – 15 izolací, prům. počet IEQ±SD 130 122± 78 458, počet TX 3. Rok 2006 – 32 izolací, prům. počet IEQ±SD 217 639±120 403, počet TX 5. Rok 2007 – 33 izolací, prům. počet IEQ±SD 165 507±113 522, počet TX 6+2 autoTX. Rok 2008 – 13 izolací, prům. počet IEQ±SD 154 433± 94 826, počet TX 3+1 autoTX.
Izolační proces je zatím stále málo efektivní -většinou se podaří získat méně než 1/3 ostrůvků přítomných v pankreatu, které mohou být navíc funkčně poškozeny. Úspěšnost izolace též významně závisí na kvalitě dárcovských orgánů. Transplantace ostrůvků je relativně bezpečným zákrokem v porovnání s orgánovou transplantací. I když se nepodaří dosáhnout nezávislosti na exogenním inzulinu (často je nutné transplantaci opakovat), výrazně se stabilizuje průběh diabetu a eliminují hypoglykémie.
Podporováno VZ IKEM (MZO 00023001).